細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

BHK-21細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持BHK-21細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含BHK-21細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于BHK-21細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎培養(yǎng)基                  445 ml

特級胎牛血清                    50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠氧化型(GSSG)pcr檢測試劑盒

Rat resistin (Resistin) ELISA Kit 大鼠抵抗素(Resistin)試劑盒

Humanacidsphingomyelinase,ASMELISAKit 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitfor15-LO/LOXELISAKit大鼠15脂加氧酶

飲料尿素比色法定量試劑盒20次

MouseLaminin,LNELISAKit小鼠層連蛋白/板層素(LN)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠泛素結合酶(E2/UBCE)試劑盒 ，英文名： E2/UBCE ELISA Kit

Porcine Immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒

羊特定基因序列(Ovine)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISAKit羅氏沼蝦諾達病毒

體液乙酰酯酶活性化學發(fā)光法定量試劑盒20次

ELISAKitVTG鯉魚卵黃蛋白原

小鼠總   英文名稱：   Mouse Total Cholesterol   英文縮寫：   TC

小鼠壞死因子   英文名稱：   Mouse Total Tumor Necrosis Factor   英文縮寫：   TNF

小鼠轉鐵蛋白受體   英文名稱：   Mouse ansferrin Receptor   英文縮寫：   TFR

小鼠轉移趨化生長因子β   英文名稱：   Mouse ansforming Growth Factor β   英文縮寫：   TGFβ

RNF4單克隆抗體

MAD3蛋白抗體

TP53重組食蟹猴 p53 / TP53 蛋白 Protein

MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質金屬蛋白酶-9抗原

PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 標簽)

IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Interleukin?????

BHK-21 細胞專用培養(yǎng)基MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質金屬蛋白酶-9抗原

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 標簽)

TP53重組食蟹猴 p53 / TP53 蛋白 Protein

IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白

PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein