細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

兔原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠2(VD2)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒

Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgG試劑盒雞流行性乙型腦抗體IgG(JEIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人中期因子(MK)ELISA 試劑盒

People / endotoxin lipopolysaccharide (LPS) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)試劑盒

Humanmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 人黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)pcr檢測試劑盒分裝

HumanHydrocoisone,HYD試劑盒人(HYD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織肌酸激酶(CK)活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒25次

Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠   英文名稱：   Cytochrome C   英文縮寫：   Cytochrome C

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白   英文名稱：   Mouse C Reactive Protein HS   英文縮寫：   CRP-hs

小鼠鈣蛋白   英文名稱：   Mouse Calprotectin   英文縮寫：   CP

小鼠細(xì)胞表面分子CD100   英文名稱：   Mouse cluster of differeiation 100   英文縮寫：   CD100

補(bǔ)體C2抗體

囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B

IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原

SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 Protein

CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

兔原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原

CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 Protein